(Los acentos fueron
obviados por cuestiones tecnicas)
Un procedimiento desarrollado por investigadores de
diferentes universidades logro simplificar la etapa
de purificacion de la Eritropoyetina Humana (EPO rh).
Su uso llevo a que los pacientes requiriesen menor
cantidad de transfusiones y, en consecuencia,
estuviesen menos expuestos a los inconvenientes que
implica recibir sangre de dadores.
La eritropoyetina humana recombinante es una hormona
glicoproteica que se usa para tratar a pacientes con
insuficiencia renal que requieren de dialisis, y en
otras anemias, como las asociadas a las terapias de
cancer, hepatitis C y Sida. Tambien se la utiliza en
el tratamiento o la prevencion de la anemia del
prematuro. En la actualidad, se la postula, ademas,
como candidata terapeutica para otras patologias.
Los metodos de produccion actuales son costosos, ya
que demandan sucesivas etapas de purificacion. La
eritropoyetina adquirio renombre en la prensa
mundial, desafortunadamente, por varios escandalos
de dopaje en el deporte, en especial en el ciclismo
de alta competicion, por lo que fue llamada la
“droga del ciclista”, dada su capacidad de
incrementar la produccion de globulos rojos en corto
tiempo.
Por citar uno de los casos mas resonantes y aciagos:
el del recordado ciclista italiano Marco Pantani,
“Il Pirata”, a quien se considero uno de los mejores
escaladores de todos los tiempos. Habia sido campeon
del Giro de Italia y del Tour de Francia en 1998. En
1999, luego de haber ganado en cuatro etapas del
Giro y haberse constituido en lider de la
competencia, fue descalificado al superar la tasa
permitida de hematocrito -porcentaje del volumen
total de sangre compuesta por globulos rojos-, lo
que muy probablemente significaba que habia
consumido EPO, sustancia prohibida dado que produce
una mejora significativa de la marca deportiva en
los ejercicios de larga duracion. El 14 de febrero
de 2004, a los 34 años, Pantani fue hallado muerto
en la habitacion de un hotel en Rimini, debido a una
sobredosis de antidepresivos y cocaina, droga a la
que era adicto.
La produccion de eritropoyetina recombinante humana
(EPO rh) requiere de un complejo proceso de
separacion y purificacion para aislarla del medio de
cultivo en el cual es producida. “Los procedimientos
pueden demandar entre un 60 y 80% de los costos
totales de produccion. Esto es debido a que los
criterios de calidad requeridos para los productos
que tendran uso terapeutico son muy estrictos”,
explican los investigadores Maria Martinez-Ceron,
Mariela Marani, Marta Taules, Marina Etcheverrigaray,
Fernando Albericio, Osvaldo Cascone y Silvia Camperi,
en un articulo reciente de la revista “ACS
Combinatorial Science”.
Debido a que la administracion de la EPO rh es
parenteral, es decir, se introduce en el organismo
por via subcutanea intravenosa, la hormona debe
tener un grado de pureza mayor al 99% y es, por lo
tanto, la purificacion el paso critico en su proceso
de produccion. La EPO humana nativa fue purificada
por primera vez en 1977 por T. Miyake y
colaboradores, a partir de orina de pacientes con
anemia aplasica severa, un trastorno por el que se
produce un desarrollo defectuoso o incompleto de las
lineas celulares de la medula osea. Desde que F. Lin
descubrio el gen, en 1984, se pudo obtener la EPO
recombinante humana (EPO rh) de uso terapeutico que
es equivalente, inmunologica y funcionalmente, a la
que fabrica el organismo. Es el principal regulador
fisiologico del proceso de maduracion y
diferenciacion de los progenitores hematopoyeticos
eritroides en la medula osea. Ademas, mantiene los
niveles fisiologicos de los globulos rojos
circulantes.
“Normalmente, el proceso de purificacion consiste
en multiples etapas de separacion. En consecuencia,
se hace necesario mejorar cada etapa, considerada en
forma individual, pero tambien, combinar estos pasos
de modo adecuado para incrementar la eficacia global
del proceso”, explica Cascone a Argentina Investiga.
El metodo desarrollado por este equipo de
investigadores de las universidades de Buenos Aires,
del Litoral y Barcelona, opera en tres pasos: en
primera instancia se obtiene un sobrenadante de
cultivo libre de celulas por centrifugacion o
filtracion. “El segundo paso consiste en
acondicionar ese sobrenadante por diafiltracion y,
el tercero, en purificar la EPO rh por cromatografia
de afinidad con peptidos inmovilizados en un soporte
adecuado. Estos peptidos son seleccionados por
screening de una biblioteca combinatoria sintetica”,
detalla Camperi.
Es decir, este proceso resulta particularmente
eficiente debido, por un lado, a la alta
selectividad que se establece entre la proteina y el
peptido; y por el otro, dado que conjuga las etapas
de captura y de purificacion fina en un solo paso,
simplificandolo de modo notable y haciendo que los
costos de producir eritropoyetina recombinante
humana desciendan de modo considerable.
Rodolfo Zibell
Subsecretaria de Relaciones Institucionales
Universidad de Buenos Aires
Fuente: Argentina Investiga
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